Na água, nos alimentos e na superfície em que tocamos há um mundo microscópico que não é possível ver a olho nu com milhares de microrganismos que podem ou não serem maléficos ao ser humano. Por conta disso, é necessária a análise microbiológica do que consumimos, este é um dos fatores essenciais para avaliar a segurança do consumo de um produto.
Coliformes são bactérias que servem como indicadores de contaminação. Muitas vezes presentes em ambientes aquáticos e em produtos alimentares, oque pode sinalizar a presença de outros microrganismos patogênicos que podem causar doenças. Os principais tipos de bactérias coliformes são:
Observação: O termo “coliforme” está associado ao intestino (“cólon”), mas o grupodos coliformes totais inclui bactérias de origem fecal e não fecal.
A detecção de bactérias coliformes é realizada por meio de métodos microbiológicos que envolvem a incubação de amostras em meios de cultura específicos.
Princípio: A amostra de água ou de alimento homogeneizado passa por uma série de diluições sucessivas e é inoculada em tubos de fermentação contendo caldo Lauryl Tryptose ou caldo Verde Brilhante. Esses tubos são incubados a 35 °C por um período de 24 a 48 horas.
Detecção: A presença de gás no tubo de Durham (um pequeno tubo invertido dentro do tubo de ensaio) indica uma reação positiva, ou seja, sugere que há coliformes na amostra analisada.
Enumeração: O número de tubos positivos (aqueles que apresentaram gás) em cada diluição é comparado a tabelas estatísticas conhecidas como tabelas de McCrady. A partir dessa comparação, é possível estimar o Número Mais Provável (NMP) de coliformes por mililitro ou grama de amostra. Apesar de ser um método confiável, ele demanda mais tempo e materiais de laboratório.
Esse método é muito usado para analisar a qualidade microbiológica da água. Nele, um volume conhecido da amostra é filtrado por uma membrana esterilizada com poros de 0,45 µm, que retém as bactérias presentes. Em seguida, a membrana é colocada em uma placa com meio de cultura seletivo, como o Ágar Endo, que favorece o crescimento de coliformes.
Após incubação a 35 °C por 24 horas, as colônias de coliformes se tornam visíveis geralmente com um brilho metálico característico. Cada colônia representa uma Unidade Formadora de Colônia (UFC), e o resultado final é expresso como UFC por 100 mL de amostra. É um método rápido, preciso e amplamente utilizado para monitorar a contaminação bacteriana em águas.
Muito utilizado na análise de alimentos, esse método consiste em inocular pequenas porções da amostra em placas de Petri estéreis e adicionar o Ágar Violeta Red Bile (VRBA), que é fundido e resfriado a cerca de 45 °C.
O VRBA é um meio seletivo: ele inibe o crescimento de bactérias Gram-positivas e permite identificar os coliformes totais, que fermentam a lactose, formando colônias vermelho-púrpura, geralmente cercadas por um halo esbranquiçado de bile precipitada. Após incubação a 35 °C por 24 horas, as colônias visíveis são contadas, indicando o número de coliformes presentes na amostra.
Por meio dos tópicos apresentados acima, podemos notar a importância da análise microbiológica na detecção de coliformes e patógenos que possibilita a identificação desses microrganismos ajudando a evitar surtos gravíssimos em toda população nos trazendo mais segurança e um grande suporte para a integridade sanitária.
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